CEEX 142/2006 BIOFILM

Proiect VIASAN CEEX 142/2006

TITLul Constituirea unei retele integrate pentru studiul biofilmelor microbiene pe substraturi celulare si protetice, in scopul imbunatatirii diagnosticului si tratamentului infectiilor cauzate de biofilme

Acronim:BIOFILM

Perioada de desfasurare: 04.09.2006-10.10.2008

Coordonator: Universitatea din Bucuresti, Facultatea de Biologie

Director de proiect: Prof. dr. Veronica LAZAR

Parteneri:

P1 Institutul National de Virusologie “Stefan S. Nicolau”

Responsabil de proiect – CS III drd Coralia Bleotu

P2 Universitatea de Medicina si Farmacie ‘Carol Davila’

Responsabil de proiect – Prof. dr. Teodor Traistaru

P3 Universitatea Politehnica din Bucuresti – Centrul de Microscopie – Microanaliza si Procesarea Datelor

Responsabil de proiect – Prof. dr. Gheorghe Stanciu

P4 Institutul National Cercetare – Dezvoltare pentru Stiinte Biologice Bucuresti

Responsabil de proiect – Dr. Lucia Moldovan

P5 Institutul pentru Ocrotirea Mamei si Copilului ‘Alfrede Rusescu’

Responsabil de proiect – Conf. dr. Suciu Nicolae

P6 Institutul de Boli Cardiovasculare ‘C.C. Iliescu’

Responsabil de proiect – Biol. drd. Otilia Banu

REZUMAT

Biofilmele sunt implicate in 60 si 85% dintre infectiile aparute in tarile dezvoltate, caracterizate prin debut lent, simptome de intensitate medie, tendinta spre cronicizare si rezistenta la tratamente cu antibiotice. Avind in vedere diferentele in fiziologia si sensibilitatea la antibiotice a bacteriilor incluse in biofilme, eforturile de gasire de noi metode de studiu al proceselor de aderenta si agregare, ca si de noi strategii de tratament al infectiilor consecutive dezvoltarii de biofilme microbiene sunt absolut necesare, iar importanta problemei este reflectata si de deciziile la nivelul comunitatii europene stiintifice. Astfel, in anul 2005, cu ocazia ECCMID 2005 (European Congress for Clinical Microbiology and Infectious Diseases) a fost lansat grupul european de studiu al biofilmelor (ESCMID Biofilm Study Group). Pentru realizarea prezentului proiect s-au reunit colective din arii de cercetare diverse şi complementare din unităţi şi instituţii de cercetare, universităţi si clinica pentru o abordare multidisciplinara, globala a problemelor propuse spre soluţionare, a caror experienta de cercetare poate sta la baza constituirii unei reţele de cercetare de excelenţă, ce asigura atingerea nivelului de compatibilitate şi competitivitate necesar pentru integrarea deplină în aria europeană de cercetare. Obiectivul general al proiectului este obtinerea si diseminarea informatiilor metodologice si stiintiifice asupra biofilmelor cu relevanta pentru sanatatea umana, in vederea imbunatatirii rezultatelor profilaxiei si terapiei infectiilor cu producere de biofilme. Activitati specifice: crearea unei baze materiale necesare desfasurarii activitatilor de cercetare (constituirea unei colectii de tulpini microbiene izolate din infectii cu producere de biofilme microbiene dezvoltate pe substraturi celulare si dispozitive protetice); stabilirea parametrilor intrinseci si extrinseci ai aderentei microbiene la substraturi naturale si artificiale prin utilizarea unor modele experimentale originale de formare a biofilmelor artificiale monospecifice ; determinarea in vitro a rezistentei fenotipice (comportamentale) a bacteriilor aderate si incluse in biofilme monospecifice, la diferiti factori cu activitate antimicrobiana; studiu pilot de implementare in clinica a metodei de testare a sensibilitatii la antibiotice a bacteriilor izolate din infectii cu producere de biofilme si de stabilire a dozelor terapeutice; selectarea de combinatii sinergice active pe microoganisme incluse in biofilme; elaborarea, pe baza rezultatelor obtinute a unui ghid de diagnostic si a unor metode de profilaxie si tratament al infectiilor cu microorganisme aderate la substraturi celulare si inerte. Ca membru al ESGB, directorul de proiect va realiza contactul permanent cu grupurile de studiu europene, iar in realizarea proiectului vom beneficia de consultanta si sprijin logistic din partea Universitatii din Copenhaga, Departamentul de Microbiologie Medicala si Imunologie. Proiectul se incadreaza in ariile tematice de cercetare completa 1 (Sanatate) si 11 (Stiinte de baza) urmarind dobândirea de cunostinte avansate intr-un domeniu de varf al cercetarii fundamentale cu larga aplicabilitate practica in domeniul sanatatii publice, prin predictia oportunitatii si eficientei terapiei antimicrobiene in cazul infectiilor cu formare de biofilme, abordarea rezistentei la medicamente antimicrobiene, transferarea rezultatelor cercetarii in tratarea bolilor infectioase, urmarind, devoltarea si validarea unor modele adecvate pentru studiul rezistentei biofilmelor la actiunea substantelor antimicrobiene.

OBIECTIV GENERAL

Obtinerea si diseminarea informatiilor metodologice si stiintiifice asupra biofilmelor cu relevanta pentru sanatatea umana, in vederea imbunatatirii rezultatelor profilaxiei si terapiei infectiilor cauzate de biofilme.

OBIECTIVE MASURABILE

ACTIVITATI

1. Dezvoltarea unei baze materiale necesare desfasurarii activitatilor de cercetare.

1.1. Elaborarea de protocoale standard de recoltare, prelucrare si stocare a probelor;

1.2. Constituirea unei colectii de tulpini microbiene recent izolate din infectii cu producere de biofilme microbiene dezvoltate pe substraturi naturale si artificiale;

1.3. Completarea infrastructurii logistice si de cercetare.

2. Stabilirea parametrilor intrinseci si extrinseci ai aderentei microbiene la substraturi naturale si artificiale prin utilizarea unor modele experimentale originale de formare a biofilmelor artificiale monospecifice.

2.1. Determinarea prin metode calitative (microscopie optica, electronica, de transmisie, confocala si cu baleiaj), semicantitative (productia de exopolizaharid) si cantitative (hidrofobicitate celulara, indice de aderenta si invazie) a capacitatii de aderenta si de formare a biofilmelor pe diferite substraturi (celulare si inerte);

2.2. Studiul influentei diferitelor caracteristici ale substratului celular (ex. tipul celular, calitatea monostratului, distributia receptorilor pe celule sensibile, preinfectia virala si influenta acesteia in exprimarea receptorilor) sau a tipului de material inert (tipul de biopolimeri, aliaje) asupra capacitatii de aderenta a microorganismelor testate;

2.3. Selectarea substraturilor inerte utilizate in medicina cu rezistenta crescuta la colonizarea microbiana si extrapolarea rezultatelor la subtraturi utilizate in industria alimentara, farmaceutica, cosmetica, biotehnologie;

2.4. Evidentierea transferului orizontal de gene intre celulele incluse in biofilme prin tehnici moleculare de evidentiere a markerilor genetici de rezistenta la antibiotice (la celulele sensibile la izolare si devenite rezistente prin cultivare in biofilme mature) si prin metode biochimice de cuantificare a productiei de enzime implicate in degradarea antibioticelor de catre celulele biofilmelor.

3. Determinarea in vitro a rezistentei fenotipice (comportamentale) a bacteriilor aderate si incluse in biofilme monospecifice, la diferiti factori cu actiune antimicrobiana.

3.1. Determinarea rezistentei biofilmelor monospecifice la antibiotice si dezinfectante utilizate la ora actuala in clinica, cu optimizarea si promovarea unui parametru de evaluare a concentratiei minime inhibitorii de substante antimicrobiene eficiente pe biofilme (CMIB);

3.2. Studiul eficientei unor substante chimice nou –sintetizate in eradicarea biofilmelor monospecifice aparute pe diferite substraturi;

3.3. Testarea eficientei unor strategii alternative de combatere a biofilmelor bazate pe produse de origine vegetala, probiotice si substante prebiotice;

3.4. Screening-ul si selectarea unor combinatii sinergice de substante antimicrobiene eficiente pe biofilme.

4. Studiu pilot de implementare in clinica a metodei de testare a sensibilitatii la antibiotice a bacteriilor izolate din infectii cu producere de biofilme.

5. Elaborarea, pe baza rezultatelor obtinute a unui ghid de profilaxie, diagnostic si tratament al infectiilor cu microorganisme aderate la substraturi celulare si inerte (in vederea cresterii eficientei deciziilor terapeutice in cazul infectiilor cu producere de biofilme: ex. ajustarea dozelor terapeutice, schimbarea tratamentului, indepartarea sau inlocuirea dispozitivului protetic)

REZULTATE OBTINUTE

Emergenţa fenomenelor de rezistenţă la antibiotice reprezintă o problemă majoră de sănătate publică datorită creşterii incidenţei infecţiilor oportuniste cu tulpini bacteriene, fenomen agravat de producerea de biofilme bacteriene pe substraturi celulare sau biomateriale utilizate în medicina.

Identificarea tulpinilor microbiene izolate din placa dentara a relevat o mare diversitate a speciilor microbiene aerobe si aerobe facultativ anaerobe reprezentate de Burkholderia cepacia, Pseudomonas aeruginosa, Serratia liquefaciens, Enterobacter cloacae, Eikenella corodens si Candida albicans, care sustine ipoteza placii bacteriene nespecifice implicate in etiologia afectiunilor periodontale. 

Pattern-ul colonizarii in vitro al diferitelor materiale protetice orale este determinat de structura suprafetelor si de compozitia chimica a materialelor, dar este de asemenea dependenta de speciile pionier colonizatoare. Dintre materialele de amprenta, polieterii şi siliconii de adiţie, chitos şi de condensare promovează menţinerea viabilităţii celulare la valori crescute chiar la 96 de ore, comparativ cu celelalte materiale testate. 
In ceea ce priveste aliajele utilizate in stomatologie, grosimea biofilmelor stabilita prin CLSM a sustinut rezultatele numaratorii celulelor viabile demonstrand, prin faptul ca nu a fost observata o colonizare preferentiala a diferitelor aliaje in ciuda faptului ca dezvoltarea biofilmelor tinere pe diferite suprafete pare a fi corelata cu gradul de rugozitate a suprafetelor, biofilmele formate au fost cantitativ similare, cu unele rare exceptii.
Dezvoltarea in vitro a biofilmelor monospecifice pe diferite materiale protetice folosite in medicina orala ar putea fi foarte folositoare in selectia diferitelor materiale cu proprietati anti-aderente si alegerea unui tratament stomatologic optim.

Preinfectia virala a substratului celular sensibil influenteaza capacitatea de aderenta si invazie a tulpinilor bacteriene prin:

Ø intensificarea capacitatii de aderenta, fapt ce explica incidenta crescuta a infectiilor bacteriene consecutiv infectiilor virale, ca si colonizarea bacteriana mai rapida a organismelor imunocompromise;

Ø reducerea capacitatii de invazie a celulelor epiteliale de catre tulpinile bacteriene, aspect care pledeaza pentru incidenta crescuta a patogenilor extracelulari in etiologia infectiilor bacteriene postvirale.

 
Cresterea dozelor de antibiotice (mult superioare CMB!!!) ramine ineficienta in tratarea infectiilor cu producere de biofilme, o posibila alternativa fiind identificarea combinatiilor optime de antibiotice sinergice aplicabile in tratamentul  acestora. 
Gradul de colonizare si de formare a biofilmelor bacteriene depinde de natura substratului inert, ceea ce demonstreaza importanta  selectarii corecte a materialelor din care sunt alcatuite dispozitivele protetice in vederea prevenirii colonizarii bacteriene.

Comportamentul bacteriilor sesile este diferit de cel al celulelor planctonice, antibiograma clasica nereprezentand un model de predictie corect al patternului de antibiorezistenta al acestora, impunandu-se necesitatea introducerii unei metode standardizate de testare a sensibilitatii tulpinilor bacteriene izolate din infectii formatoare de biofilme.

Gradul de colonizare si de formare a biofilmelor bacteriene depinde de natura substratului inert, ceea ce demonstreaza importanta selectarii corecte a materialelor din care sunt alcatuite dispozitivele protetice in vederea prevenirii colonizarii bacteriene si necesitatea selectarii unor modele experimentale adecvate, cu predicibilitate ridicata pentru eficienta in vivo a substantelor antimicrobiene testate. Cresterea dozelor de antibiotice (mult superioare CMB!!!) ramine ineficienta in tratarea infectiilor cu producere de biofilme, indiferent de localizarea acestora in organism. o posibila alternativa fiind identificarea asocierii optime de antibiotice aplicabile in tratamentul acestora.

Cel mai eficient antibiotic, care a inhibat dezvoltarea biofilmelor atat la concentratii mari, cit si la concentratii subinhibitorii a fost ciprofloxacinul, care probabil determina inhibarea biofilmelor atat prin efect bactericid direct, cat si datorita interferentei cu sistemele de semnalizare intercelulara care sunt esentiale in initierea si mai ales, maturarea biofilmului microbian.

Analiza fenotipicǎ a celulelor tratate cu sǎruri metalice de tip azotat perclorat şi acetat şi a combinaţilor complexe cu acestea a demonstrat cǎ expresia actinei scade In prezenţa acestor substanţe comparativ cu martorul. Excepţie fac sǎruri de tip acetat ale Zn şi speciile compleze ZnDA.

Acidul usnic, ca alternativa ecologica la utilizarea antibioticelor a inhibat dezvoltarea biofilmelor de tulpini microbiene, actionand probabil ca inhibitor al QS, oferind astfel posibilitatea folosirii unor noi strategii antiinfectioase ecologice ca o alternativa la antibioterapia conventionala.

Emergenţa fenomenelor de rezistenţă la antibiotice reprezintă o problemă majoră de sănătate publică datorită creşterii incidenţei infecţiilor oportuniste cu tulpini bacteriene, fenomen agravat de producerea de biofilme bacteriene pe substraturi celulare sau biomateriale utilizate în medicină.

Comportamentul bacteriilor sesile este diferit de cel al celulelor planctonice, antibiograma clasica nereprezentand un model de predictie corect al patternului de antibiorezistenta al acestora, impunandu-se necesitatea introducerii unei metode standardizate de testare a sensibilitatii tulpinilor bacteriene izolate din infectii formatoare de biofilme.

Gradul de rezistenta fenotipica a biofilmelor bacteriene la antibiotice depinde de natura substratului celular/inert, ceea ce demonstreaza necesitatea selectarii unor modele experimentale adecvate, cu predicibilitate ridicata pentru eficienta in vivo a substantelor antimicrobiene testate.

Cresterea dozelor de antibiotice (mult superioare CMB!!!) ramine ineficienta in tratarea infectiilor cu producere de biofilme, o posibila alternativa fiind identificarea asocierii optime de antibiotice aplicabile in tratamentul acestora.

Biofilmele de S. aureus s-au dovedi mai sensibile la antibioticele selectate, spre deosebire de biofilmele de Ps. aeruginosa.

Cel mai eficient antibiotic, care a inhibat dezvoltarea biofilmelor atat la concetratii mari, cit si la concentratii subinhibitorii a fost ciprofloxacinul, care probabil determina inhibarea biofilmelor atat prin efect bactericid direct, cat si datorita interferentei cu sistemele de semnalizare intercelulara care sunt esentiale in initierea si mai ales, maturarea biofilmului microbian.

Analiza fenotipicǎ a celulelor tratate cu sǎruri metalice de tip azotat perclorat şi acetat şi a combinaţilor complexe cu acestea a demonstrat cǎ expresia actinei scade In prezenţa acestor substanţe comparativ cu martorul (36,31%). Excepţie fac sǎruri de tip acetat ale Zn (41,60%) şi speciile compleze ZnDA (65,42%).

Acidul usnic poate influenta dezvoltarea biofilmelor de Ps. aeruginosa si S. aureus actionand probabil ca inhibitor al QS, oferind astfel posibilitatea folosirii unor noi strategii antiinfectioase ecologice ca o alternativa la antibioterapia conventionala.

Diseminarea rezultatelor

-          32 comunicari prezentate la conferinte internationale
-          2 conferinte prezentate la  manifestari nationale si internationale
-          10 lucrari publicate in extenso in reviste cotate ISI, 1 publicatie in reviste cotata CNCSIS B+

Reviste cotate ISI

1. Rodica Olar, Mihaela Badea, Elena Cristurean, Carmen Parnau, Dana Marinescu „Thermal behaviour of new n,n-dimethylbiguanide complexes having selective and effective antibacterial activity„J. Therm. Anal. Calor., 84(1)(2006) 53-58.

2. Olar Rodica, Badea Mihaela, Lazar Veronica, Balotescu Carmen, Cristurean Elena, Marinescu Dana 2007 Thermal behavior of some N,N-dimethylbiguanide derivatives displaying antimicrobial activity, , J. Therm. Anal. Calor., VOL 88; NUMBER 2, page(s) 323-327

3. Mariana Carmen Chifiriuc, Coralia Bleotu, Mariana Lixandru, Carmen Iordache, Cristina Larion, Dracea Olguta, Veronica Lazar, Anca Michaela Israil“ Internalization of Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa bacterial cells by non-phagocytic, epithelial human cells from central venous catheter related infections by three laboratory methods”. Roumanian Biotechnological Letters, 2008 vol 13.nr 2 p3651-3658

4. Mariana Carmen Chifiriuc, Cristina Larion, Carmen Iordache, Mariana Lixandru, Olguta Dracea, Coralia Bleotu, Marcela Bucur, Anca Michaela Israil “Influence of soluble mediators upon the expression of different physiological and virulence hallmarks of bacteria” from central venous catheter related infections by three laboratory methods. Roumanian Biotechnological Letters, 2008 vol 13.nr 2 p.3631-3642.

5. Mariana Carmen Chifiriuc, Cristina Larion, Carmen Iordache, Mariana Lixandru, Olguta Dracea, Coralia Bleotu, Marcela Bucur, Anca Michaela Israil Influence of soluble mediators upon the expression of different physiological and virulence hallmarks of bacteria, , articol in extenso publicat in Roumanian Biotechnological Letters, 2008, vol. 13, 2, 3631-3642

6. Rodica Olar, Mihaela Badea, Maria Nicoleta Grecu, Dana Marinescu, Veronica Lazar, Carmen Balotescu „Thermal behavior , spectroscopic and biological characterization of copper(II) complexes with n,n-dimethylbiguanide„J. Therm. Anal. Calor., 92 (1) (2008) 239-243.

7. Rodica Olar, Mihaela Badea, Oana Carp, Dana Marinescu, Veronica Lazar, Carmen Balotescu, Anca Dumbrava„ Synthesis, characterisation and thermal behaviour of some thiosulfato- and sulfato copper (II) complexes. Antibacterial activity „J. Therm. Anal. Calor., 92 (1) (2008) 245-251

8. Katarzyna Wysocka, Agnieszka Ulatowska-Jarża, Joanna Bauer, Iwona Hołowacz, Bogdan Savu, George Stanciu, Halina Podbielska, AFM examination of sol–gel matrices doped with photosensitizers, Optica Applicata, Vol. XXXVIII, No. 1, 2008.

9. Veronica Lazar, Mariana Carmen Chifiriuc, Marcela Bucur, 1Mihai Burlibasa, Ruxandra Sfeatcu, Gheorghe Stanciu, Bogdan Savu, Teodor Traistaru, Cristina Dragomir, Ramona Cernat, Ioana Suciu Detection, Quantifiation And Investigation Of Virulence Potential Of Dental- Plaque Formers By Optic And Confocal Laser Scanning Microscopy And Microbiological Assessment Tools. (manuscript accepted for publication in Rev. Med. Chir.)

10. Mariana Carmen Chifiriuc, Coralia Bleotu, Elena Sasarman, Veronica Lazar, Diana Smarandache, Tatiana Vassu, Ileana Stoica, Olguta Dracea, Carmen Iordache, Marcela Bucur, Cristina Larion, Oana Avram, Dana Cristea Preliminary studies for the selection of a new probiotic product to prevent and treat the diarrheal disease in infant child, in press. In Curr. Op. Molecular Biology

Reviste cotate CNCSIS B+

1 Iordache F., Iordache C., Chifiriuc M.C., Bleotu C., Pavel M., Pelinescu D., Sasarman E., Lazar V., Bucur M., Dracea O., Larion, C., Cotar A., Lixandru M. Antimicrobial and immunomodulatory activity of some probiotic fractions with potential clinical application. Archiva Zootehnica, 11:3, 41-51, 2008

Comunicari orale

1. Veronica Lazar – Biofime microbiene: arhitectura, proprietati si implicatii in Stomatologie - a 3- a Conferinta Nationala de Paradontologie si a 12-a Editie a Congresului International UNAS- 10 Octombrie 2008

2. Veronica Lazar, Mariana Carmen Chifiriuc, Coralia Bleotu, Carmen Iordache, Mariana Lixandru, Marcela Bucur, Olguta Dracea, Cristina Larion. Cytokinic profile as a tool in the investigation of bacterial – eukaryotic crosstalk, XXXIth Congress of the Society of Microbial Ecology and Disease Djuronaset Kursgard, Stockholm, Suedia, 28-30 mai 2008.

Lucrari stiintifice prezentate ca poster la manifestari nationale

1. O. Dracea, C. Bleotu, D. Cristea, C. Iordache, M. Lixandru, E. Viziteu, M. Bucur, C. Larion, C. Balotescu, V. Lazar. Studiul influentei infectiei virale asupra capacitatii de aderenta si invazie a substratului celular de catre tulpini bacteriene cu potential patogen. Al III-lea Simpozion Acad. N. Cajal, 28-29 Martie, Bucuresti, 2007

2. C. Larion, C. Balotescu, C. Bleotu, M. Bucur, O. Dracea, C. Iordache, M. Lixandru, D. Cristea, V. Lazar, A. M. Israil. Studiul activitatii antimicrobiene si citotoxice ale unor extracte vegetale. Al III-lea Simpozion Acad. N. Cajal, 28-29 Martie, Bucuresti, 2007

3. Carmen Iordache, Mariana Lixandru, Daniela Cristea, Marcela Bucur, Cristina Larion, Olguta Dracea, Carmen Balotescu, Bogdan Savu, Coralia Bleotu, Otilia Banu, Anca Israil, Veronica Lazar. Investigarea rezistentei fenotipice la antibiotice a unor biofilme experimentale monospecifice de Pseudomonas aeruginosa si Staphylococcus aureus. A XI-a Reuniune Nationala de Microbiologie, Mamaia, 23-26 Iunie 2007

Lucrari stiintifice prezentate ca poster la manifestari internationale

1.      V. Lazar, C. Balotescu, M. Bucur, C. Dragomir, M. Burlibasa, B. Savu, T. Traistaru Detection, quantifiation and investigation of virulence potential of  dental- plaque formers by optic and scanning electron microscopy and microbiological assessment tools. (Bucharest, RO) Abstract no. 956. 17th ECCMID,Munchen, Germany, 31 March-4th April, 2006.
2.      V. Lazar, C. Balotescu, M. Bucur, O. Banu, G. Dobrin, C. Bleotu, B.  Savu, I. Sandulescu, I. Stanciu, R. Cernat. Investigation of the antimicrobial activity of different antibiotics on monospecific biofilms developed in vitro by microbial strains isolated from cardiovascular devices associated infections (Bucharest, RO) Abstract no. 1953 Submitted for the 17th ECCMID,Munchen, Germany, 31 March-4th April, 2006.

3. G.A. Stanciu, I. Sandulescu, B. Savu, S.G> Stanciu, K.M. Paraskevopulus, X. Chatzistavrou, E. Kontonasaki, P. Koidis. Invstigation of hydroxyapatite growth on the bioactive glass surface. International Conference on Biomedical and Pharmaceutical Engineering (ICBPE 2006), Singapore, 8-14 Decembrie, 2006

4. Veronica Lazar, Mariana Carmen Balotescu, Marcela Bucur, Bogdan Savu, Gheroghe Stanciu, Ramona Cernat, Sorin David. Effects of novel nanostructured biomaterials on the adhesion and biofilm formation of different microbial strains in vitro. SOMED Congress, Rome, Italy, 16-18 Sept., 2007

  1. Iordache C., Balotescu C., Lazar V., Antohe F., Lixandru M.S., Sabin S., Moldovan L., Savu B., Banu O. Inhibitory effect of colistine on pseudomonas biofilms development evaluated by transmission electronic microscopy and scanning confocal laser microscopy. I4th Congress of the European Society for Emerging Infections, 30th September to 3rd October 2007, Lisbon – Portugal
  2. Veronica Lazar, Marcela Bucur, Bogdan Savu, Gheorghe Stanciu, Ion Sandulescu, Andreea Rosu, Mihai Burlibasa, Olguta Dracea, Carmen Iordache. Study of experimental biofilms formed by microbial strains isolated from dento-gingival plaque on different oral materials. Bacterial Adaptation Mechanisms: Biofilms, Hypermutability and Antibiotic resistance (BAMBHAR)" 7th - 9th of November, 2007 in Palma de Mallorca, Spain
  3. Lazar V, Iordache C, Bucur M, Balotescu C, Lixandru M S, Sabin S, Moldovan L, Banu O. Inhibitory effect of gentamycin on staphylococcus aureus biofilms development evaluated by transmission electronic microscopy and quantitative methods. Mechanisms: Biofilms, Hypermutability and Antibiotic resistance (BAMBHAR)" 7th - 9th of November, 2007 in Palma de Mallorca, Spain

8. M. BURLIBASA, I IONESCU, R. SFEATCU, C. BALOTESCU CHIFIRIUC, L. BURLIBASA, Establishment and develo-pment of microbial biofilms on brackets, 84th Congress European Orthodontic Society, 10-14 July 2008, Lisbon.

9. M. BURLIBASA, I. POPOVICI, I. IONESCU, R. SFEATCU, G. TANASE, D. ISPAS, Study of microbuial biofilms on the surface of some dental alloys used in oral implantology, Congress of Baltic Association for Maxillofacial and Plastic Surgery, May 15-17, 2008, Tallinn, Estonia.

10. ILEANA IONESCU, MIHAI BURLIBASA, RUXANDRA SFEATCU, LILIANA BURLIBASA, AUGUSTIN MIHAI, RUXANDRA STANESCU, Comparative study of microbial contamination on impression materials, International Dental Exhibition and Meeting, Aprilie 4-6, 2008, Singapore.

11. MIHAI BURLIBASA, AUGUSTIN MIHAI, VERONICA LAZAR, CARMEN BALOTESCU-CHIFIRIUC, ILEANA IONESCU, LILIANA BURLIBASA, Repartition of microbial biofilms on metalic structures in dental medicine, International Dental Exhibition and Meeting, Aprilie 4-6, 2008, Singapore.

12. S.G. STANCIU , R. HRISTU, G.A. STANCIU, Semiconductor Quantum Dots Investigated by X-Ray Diffraction, Scanning Laser Microscopy and Atomic Force Microscopy, Junior Microscopy 2008, 14-18 Iulie 2008, Lausanne, Switzerland.

13. Magda Mitache, Marcela Bucur, Emilia Panus, Veronica Lazar, Coralia Bleotu, Mariana-Carmen Balotescu, Virulence profile of enterobacterial strains isolated from surfaces in the hospital environment, 33rd FEBS Congress & 11th IUBMB Conference, Atena, 18-22 May 2008.

  1. Mariana Carmen Balotescu Chifiriuc, Coralia Bleotu, Carmen Iordache, Mariana Lixandru, Olguta Dracea, Marcela Bucur, Ani Cotar, Monica Sarbu, Veronica Lazar, In vitro evaluation of the immunomodulatory effects of cell free probiotic cultures with anti-Staphylococcus activity, 33rd FEBS Congress & 11th IUBMB Conference, Atena, 18-22 May 2008.
  2. E. Panus, N. Rosoiu, C. Balotescu, C. Bleotu, M. Mitache, Effect of different physic-mechanical factors upon the growth and expression of virulence in Escherichia coli strains isolated from drinking and sea water, 33rd FEBS Congress & 11th IUBMB Conference, Atena, 18-22 May 2008. (publicat in FEBS Journal 275, Suppl. 1, PP8-138, pg.421.
  3. C. Bleotu, M. Balotescu Chifiriuc, C. Iordache, O. Dracea, M. Bucur, C. Larion, L. Matei, O. Banu, R. Cernat, V. Lazar, In vitro investigation of the intercellular cross-talk between opportunistic bacteria and eukaryotic cells, 18th European Congress of Clinical Microbiology and Infectious Diseases (ECCMID), Barcelona, Spain, 19-22 April, 2008
  4. Carmen Iordache, Carmen Balotescu, Coralia Bleotu, Mariana Lixandru,Cristina Larion, Olguta Dracea, Marcela Bucur, Veronica Lazar “ Evaluarea in vitro a efectului imunomodulator al supernatantelor de probiotice cu activitate anti Pseudomonas” Sesiunea Stiintifica Anuala INCDMI Cantacuzino, 15-16 ianuarie 2008.

18. Mariana Carmen Chifiriuc, Marcela Bucur, Ana Maria Stanciuc, Carmen Iordache, Veronica Lazar, Coralia Bleotu, Otilia Banu , Simona Savin, Investigation of the antibiotics influence on pseudomonas aeruginosa and staphylococcus aureus biofilms formed on cellular and inert substrata, Biofilms III 3rd International Conference, 6 - 8 October, 2008, Munich, Germany

19. Panus Emilia, Natalia Rosoiu, Balotescu Carmen, Mihaela Magdalena Mitache , Ani Cotar, Otilia Banu Cristina Larion. 2008 Comparative investigation of virulence and pathogenicity hallmarks in Escherichia coli strains isolated from environmental and clinical samples Meeting of the Three Divisions of the International Union of Microbiological Societies, August, 2008

  1. Balotescu Carmen, Mihaela Magdalena Mitache, Eliza Oprea, Badea Alina, Geana Oana Livia, Marcela Bucur, Rodica Olar, Mihaela Badea, Diana Smarandache, Veronica Lazar. 2008 Novel antipathogenic strategies against adherent enterobacterial strains isolated from the hospital environment Meeting of the Three Divisions of the International Union of Microbiological Societies, August, 2008
  2. Veronica Lazar, Balotescu Carmen, Diana Smarandache, Lia-Mara Ditu, Olguta Dracea, Marcela Bucur, Cristina Larion, Ramona Cernat, 2008 The interference between cell free lactic acid bacteria culture supernatants with the expression of virulence factors of Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa clinical strains Meeting of the Three Divisions of the International Union of Microbiological Societies, August, 2008
  3. Mihaela Magdalena Mitache, Balotescu Carmen, Eliza Oprea, Geana Oana Livia, Badea Alina, Marcela Bucur, Rodica Olar, Mihaela Badea, Diana Smarandache, Ani Cotar, Paul Ionescu, Emilia Panus, Veronica Lazar. , 2008 Investigation of new synthetic compounds and ecological products with antimicrobial activity against E. coli strains isolated from hospital environment Meeting of the Three Divisions of the International Union of Microbiological Societies, August, 2008
  4. Cristina Delcaru, Carmen Chifiriuc, Carmen Iordache, Olguta Dracea, Adrian Cotro, Anca Israil, Mariana Lixandru Investigation of the halophilic vibrios adaptation ability to different environmental stres conditions. Three Divisions of the International Union of Microbiological Societies, August September, 2008
  5. Cristea Daniela, Ciudin Lucia, Coralia Bleotu, Dorina Tatu Chitoiu, Simona Ciontea, Pencu Elena, Marcela Bucur, Cristina Larion, Carmen Iordache, Olguta Dracea. Carmen Chifiriuc. In vitro study of the invasion ability of some shigella and eiec strains. Meeting of the Three Divisions of the International Union of Microbiological Societies, August, 2008
  6. Mariana Carmen Chifiriuc, Marcela Bucur, Ana Maria Stanciuc, Carmen Iordache, Veronica Lazar, Coralia Bleotu, Otilia Banu, Simona Savin. Investigation of the antibiotics influence on Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus biofilms formed on cellular and inert substrata- Biofilms III Conference, Munich, Germany, 06-08. October 2008.

26. Rodica Olar, Mihaela Badea, Dana Marinescu, Emilia Iorgulescu, New complexes of Ni(II) and Cu(II) with macrocyclic ligands functionalised with 1,2,4-triazole – spectral, biological and thermal characterisation 14th ICTAC –International Congress on Thermal Analysis and Calorimetry, Sao Pedro, Brazil, 14-18 September, 2008, poster E04

27. Rodica Olar, Mihaela Badea, Dana Marinescu, Veronica Lazar, Carmen Chifiriuc. New complexes of Ni(II) and Cu(II) with Schiff bases functionalised with 1,3,4-thiadiazole – spectral, magnetic, biological and thermal characterisation, 14th ICTAC –International Congress on Thermal Analysis and Calorimetry, Sao Pedro, Brazil, 14-18 September, 2008, poster E05

28. Mihaela Badea, Rodica Olar, Dana Marinescu, Veronica Lazar, Carmen Chifiriuc. Thermal behaviour of new biological active cadmium mixed ligands complexes 14th ICTAC –International Congress on Thermal Analysis and Calorimetry, Sao Pedro, Brazil, 14-18 September, 2008, poster E07

29. R. Olar, M. Badea, D. Marinescu, G. Vasile, V. Lazar and C. Chifiriuc. New complexes with N,N-dimethylbiguanide displaying low citotoxicity as potential large spectrum antimicrobial agents 9th European Biological Inorganic Chemistry Conference, EUROBIC9, Wroclaw, Poland, 2-6 September, 2008, poster 144, Book of abstracts pg. 263.

30. M. Badea, R. Olar, D. Marinescu, G. Vasile, V. Lazar and C. Chifiriuc New species displaying antibacterial and antifungal activities based on acrylate complexes 9th European Biological Inorganic Chemistry Conference, EUROBIC9, Wroclaw, Poland, 2-6 September, 2008, poster 5, Book of abstracts pg. 124.

31. R. Olar, M. Badea, D. Marinescu, G. Vasile, V. Lazar and C. Chifiriuc N,N-Dimethylbiguanide complexes displaying low citotoxicity as potential large spectrum antimicrobial agents,
6th International Biometals Symposium, BioMetals2008, Santoago de Compostela, Spain, 14-18 July, poster P40, Book of abstracts pg. 126.

32. M. Badea, R. Olar, D. Marinescu, G. Vasile, V. Lazar and C. Chifiriuc Complexes of 3d metals with mixed ligands displaying antibacterial and antifungal activities.
6th International Biometals Symposium, BioMetals2008, Santoago de Compostela, Spain, 14-18 July, poster P100, Book of abstracts pg. 186.